ПЦР-диагностика «клещевых» инфекций

ПЦР-диагностика «клещевых» инфекций

980.00

Комплексное исследование крови, в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции (ПЦР) выявляют возбудителей боррелиоза (Borrelia burgdorferi), моноцитарного эрлихиоза человека (Ehrlichia chaffeensisи анаплазмоза человека (Anaplasma phagocytophilum).

Синонимы русские

ПЦР-диагностика боррелиоза, эрлихиоза и анаплазмоза

Полимеразная цепная реакция на клещевые инфекции

Синонимы английские

Tick-bornediseases, polymerasechainreaction, PCR

Lyme disease, Human ehrlichiosis, Human anaplasmosis

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Не курить в течение 30 минут до исследования.

Описание

Клещевые инфекции представляют серьезную проблему для здоровья человека. Наибольшее значение имеют следующие клещевые инфекции:

  • Болезнь Лайма (клещевой боррелиоз). Возбудителем заболевания является спирохета Borrelia burgdorferi.
  • Анаплазмоз человека, ранее известный как гранулоцитарный эрлихиоз человека. Возбудителем заболевания является α-протеобактерияAnaplasma phagocytophilum.

В обоих случаях переносчиком инфекции являются иксодовые клещиIxodesscapularis, I. ricinus, I.pacificus и I.persulcatus. В России наибольшее значение имеют виды I. ricinus и Ipersulcatus.

  • Моноцитарный эрлихиоз человека. Возбудителем заболевания является α-протеобактерия Ehrlichiachaffeensis. Переносчик инфекции – иксодовые клещи Amblyomma americanum.

Клещевые инфекции обладают рядом общих свойств:

  • Клиническая картина клещевых инфекций имеет много общих черт и неспецифична. Как правило, заболевание манифестирует в виде гриппоподобного синдрома с лихорадкой, головной болью, миалгией и артралгией. Дифференцировать клещевые инфекции между собой и с другими острыми инфекционными на основании только лишь клинической картины заболевания невозможно.
  • Некоторые иксодовые клещи инфицированы сразу двумя (реже – тремя) патогенами (ко-инфекция) и могут приводить к развитию у одного и того же человека сочетанной инфекции. Чаще описаны случаи сочетанного боррелиоза и анаплазмоза.

Учитывая эти особенности, при подозрении на клещевую инфекцию необходимо комплексное лабораторное исследование, включающее анализы на все значимые возбудители клещевых инфекций.

Для лабораторной диагностики клещевых инфекций могут применяться несколько методов, в том числе серологические тесты,  анализ окрашенного мазка крови, бактериологический посев, иммуногистохимический анализ и методы молекулярной диагностики. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это один из методов молекулярной диагностики, позволяющий выявлять в биологическом материале (например, в крови) фрагменты генетического материала (ДНК) возбудителя инфекции. Исследование обладает целым рядом преимуществ по сравнению с другими методами идентификации клещевых инфекций.

  • Быстрота получения результата. ПЦР – это один из самых быстрых на сегодняшний день методов идентификации возбудителя. В то время как для получения результата бакпосева и серологических тестов может потребоваться до нескольких недель (!), результат ПЦР может быть получен уже через несколько часов. Благодаря такой скорости, метод ПЦР считается самым лучшим способом диагностики острой инфекции.
  • Высокая чувствительность метода. Другой «быстрый» метод диагностики эрлихиоза – это окраска мазков крови по Гимзе. Обнаружение в мазках крови так называемых морул (скоплений микроорганизмов внутри лейкоцитов, напоминающие тутовую ягоду) – это характерный признак эрлихиоза и анаплазмоза. Морулы, однако, удается выявить не всегда: лишь в 3% случаев моноцитарного эрлихиоза и 25-75% случаев анаплазмоза. Чувствительность же ПЦР анализа достигает 85 % в отношении E.chaffeensisи 90%в отношенииA.phagocytophilum, что позволяет считать ПЦР не только быстрым, но и самым точным среди быстрых методов диагностики клещевых инфекций.
  • Высокая специфичность (60-85%). Специфичность метода особенно важна для дифференциальной диагностики клещевых инфекций. Известно, что, например, серологические тесты на клещевые инфекции часто дают ложноположительный результат из-за наличия перекрестных реакций, обусловленных общими антигенными свойствами указанных микроорганизмов. Так как в ПЦР используются специфические для каждого из микроорганизмов праймеры, вероятность ложноположительного результата гораздо ниже.

Следует отметить ограничения метода ПЦР:

  • Так как в реакции определяется ДНК как живых, так и погибших микроорганизмов, метод ПЦР не предназначен для оценки эффективности лечения: результат будет оставаться положительным еще в течение некоторого времени после начала эффективного лечения;
  • Чувствительность ПЦР в меньшей степени, чем других методов идентификации возбудителя, зависит от приема антибиотиков. Наиболее точный результат, однако, будет получен при заборе образца биоматериала до начала лечения антибактериальными препаратами.

В диагностике клещевых инфекций также могут помочь дополнительные лабораторные исследования. Так, характерной чертой эрлихиозов является панцитопения и умеренное повышение печеночных трансаминаз. При тяжелом течении заболевания могу наблюдаться гипонатриемия, гипокальциемия, гипомагниемия, повышение креатинина и мочевины и признаки ДВС-синдрома.

Следует отметить, что иксодовые клещи также являются переносчиками вируса клещевого энцефалита. При необходимости это комплексное ПЦР-исследование может быть дополнено исследованием на вирус клещевого энцефалита.